Con todo esto en mente, en Lister Alta Especialidad a través de nuestro Departamento de Diagnóstico Molecular hemos hecho un esfuerzo para poner a su disposición la tecnología más avanzada para ayudar al diagnóstico de sepsis. En la actualidad, ofrecemos un estudio de PCR en tiempo real multiplex para más de 90 patógenos causantes de sepsis (bacterias Gram +, bacterias Gram – y hongos). En la PCR en tiempo real, al igual que en la PCR de punto final (la PCR tradicional), se amplifica una o varias regiones de DNA genómico que son específicas del organismo de interés o son importantes para identificar características relevantes –como, en el caso de bacterias, su resistencia terapéutica genéticamente codificada. La PCR en tiempo real es una técnica que permite la cuantificación de los productos de amplificación durante la fase exponencial de la reacción de PCR. Esta característica sobre la PCR de punto final permite detectar y cuantificar el blanco molecular a medida que la reacción se lleva a cabo, y en su culminación, evita las manipulaciones posteriores a la PCR tradicional. El estudio que ofrecemos no cuantifica al agente patógeno, porque como veremos, la PCR para sepsis es anidada y cuantificar en estas circunstancias con certeza es prácticamente imposible. Sin embargo, esta metodología acorta el tiempo que dura el estudio y la velocidad a la que se conocen los resultados.
Se dice que la prueba es multiplex porque posee la característica de incorporar simultáneamente múltiples reacciones en cadena específicas para diferentes blancos. De esta forma, con un sólo programa de reacción –que comparten las múltiples reacciones simultáneas- amplificamos todos los blancos de interés que se encuentren en la muestra. En este caso hablamos de numerosos patógenos, así como de la resistencia a algunos antibióticos (resistencia a vancomicina [VanA y VanB] y a meticilina [MetB]). Una vez más, una solución de este tipo permite acortar de forma importante la identificación de patógenos y sus resistencias terapéuticas, ya que es posible obtenerlas en una sola reacción. Por ende, los resultados pueden entregarse en menos tiempo.
Adicionalmente, en una segunda reacción anidada, ofrecemos la opción de identificar de manera precisa 27 de los patógenos más comunes. La reacción se dice que es anidada porque la materia prima de ésta no es la muestra, sino los productos amplificados en la primera reacción, es una reacción secuencial. Esto permite identificar con mucho más detalle los organismos detectados en la primera reacción.
Como ya se adelantó, nuestra prueba se encuentra dividida en dos paneles, en el primero se realiza un chequeo general de la muestra que se despliega en la siguiente tabla.
El segundo panel es el panel de identificación y se reportan los siguientes microorganismos:
La muestra que se utiliza es sangre total con EDTA y posee una estabilidad corta, de 24 horas. De lunes a viernes, todas las muestras entran a proceso a la 1:00 pm y los resultados se reportan a la 1:00 pm del día siguiente, mientras que el sábado y domingo las muestras entran a proceso a las 10:00 am y los resultados se reportan a la 1:00 pm del día siguiente. Todas las muestras se deben tomar después de la 1:00 pm y deben ser enviadas el mismo día por paquetería. Debido a que los servicios de paquetería (para envío de muestras) no funcionan apropiadamente los fines de semana (lo que se envía desde el viernes se entrega hasta el lunes y el domingo no ofrecen servicio) y a que la estabilidad de la muestra es de 24 horas, Grupo Lister se ve imposibilitado a enviar muestras los fines de semana, sólo entre semana. Si alguno de nuestros clientes posee los medios para hacernos llegar oportunamente sus muestras sábados o domingos, nosotros diligentemente las procesaremos. Las muestras durante su manejo y traslado deben conservarse refrigeradas de 4 a 8°C, hasta su proceso.
Las muestras se procesan en Lister Alta Especialidad, sus datos son: Paul P. Harris Nº 102, Col. Vista Hermosa Tampico, Tamaulipas C.P. 896110
